产品目录

蛋白银染的原理是银离子可与蛋白质等大分子有机物形成稳定的复合物，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag⁺还原成银颗粒，可把蛋白电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色，其灵敏度比考马斯亮蓝高100倍。但常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等步骤组成，操作十分繁琐，尤其不适用于大批量实验。为解决此问题，本公司推出本制品。

• 超快，整个过程只需要不到60分钟。
  
• 操作简单，只有固定（30分钟）、染色（10分钟）和显影（10分钟）三步。
  
• 灵敏度比考马斯亮蓝染色高100倍，能检测到10ng的蛋白质条带。
  
• 三个成分中的两个都是现用现配，可重复性好。

1. 将自备的40mL无水乙醇、10mL乙酸和50mL去离子水充分混合即可使用。本试剂盒不含这些成分。

2. 需要配制的蛋白银染溶液A（染色液）的体积完全跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20～30mL。下面的用量是针对配制100mL蛋白银染溶液A。如果配制的蛋白银染溶液A的体积不是100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。蛋白银染溶液A需要新鲜配制。
   

   成分	用量
   自备的去离子水	80mL
   蛋白银染溶液A成分一	0.2g
   蛋白银染溶液A成分二	10mL
   蛋白银染溶液A组分三	10mL

3. 需要配制的蛋白银染溶液B（显色液）的体积完全跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20～30mL。下面的用量是针对配制100mL蛋白银染溶液B。如果配制的蛋白银染溶液B的体积不是100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。蛋白银染溶液B需要新鲜配制。
   

   成分	用量
   自备的去离子水	89.5mL
   蛋白银染溶液B成分一	10mL
   蛋白银染溶液B组分二	0.5mL

4. PAGE电泳或SDS-PAGE电泳结束后，将胶转移到装有100mL银染固定液的瓷盘中，摇晃30分钟以去除干扰银染的成分（如甘氨酸、SDS、DTT、甘油等）。
   
   • 此步很重要，否则银染背景很高。
5. 用100mL自备的去离子水漂洗2次，每次2分钟。
   
6. 将PAGE胶转移到适当体积的蛋白银染溶液A中，使蛋白银染溶液A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃处理10分钟。
   
7. 倒掉蛋白银染溶液A，用100mL自备的去离子水快速漂洗2次，每次半分钟。
   
8. 将PAGE胶转移到适当体积的蛋白银染溶液B中，使蛋白银染溶液B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到蛋白电泳条带显现（一般需要10分钟左右）。
   
9. 迅速将PAGE胶置于适当背景下照相留存。胶的颜色肯能会逐渐加深，如果有必要保存胶，可以用自备的5%的乙酸终止显色。